血液DNA提取試劑盒實驗前準備及注意事項說明
瀏覽次數(shù)：2691發(fā)布日期：2021-01-22
血液是與所有器官都有接觸的組織，蘊藏著大量寶貴信息。早前人們開發(fā)了血液活檢技術(shù)。用來分析循環(huán)腫瘤DNA、檢測血液中完整的腫瘤細胞和收集由腫瘤細胞釋放出的外泌體。還可以分析血液樣本中的腫瘤DNA，并對癌癥的基因特點進行檢測。隨著基因測序技術(shù)的快速發(fā)展，血液活檢技術(shù)以其迅速、便捷、損傷性小等優(yōu)點已經(jīng)逐步應(yīng)用于臨床。用來監(jiān)測腫瘤的術(shù)后反應(yīng)，預(yù)測腫瘤復(fù)發(fā)。還能夠協(xié)助醫(yī)生發(fā)現(xiàn)患者的無任何癥狀的早期腫瘤。
血液DNA提取試劑盒可從新鮮或冷凍的抗凝血中提取人類的或哺乳動物的基因組DNA。整個提取過程不涉及酚等試劑，提取的血液基因組片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，配合高通量的全自動核酸提取儀，可實現(xiàn)DNA的自動化提取。
血液DNA提取試劑盒在操作的時候，無需加熱，室溫(15-25℃)下即可進行全程操作，提取結(jié)果可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、熒光定量PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交，芯片檢測、高通量測序等實驗。
實驗前準備及重要注意事項：
1、向蛋白酶K中加入用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K勿長時間室溫放置，避免反復(fù)凍融，以免影響其活性。
2、所有離心操作均在室溫下完成。
3、血液樣品反復(fù)凍融，會導(dǎo)致提取的DNA的片段較小且提取量下降。所得基因組DNA也應(yīng)盡可能避免反復(fù)凍融，以免降解。如果提取冷凍血液的基因組DNA，建議37℃水浴，迅速解凍后再進行后續(xù)操作。
4、血液樣品的儲存：
1)短期保存：已加入抗凝劑的血液樣品可在2～8℃儲存到10天，對于某些實驗例如Southern雜交等，需要得到完整全長的基因組DNA，請將血液樣品在2～8℃儲存不超過3天，此時基因組DNA的降解程度較輕。
2)長期保存：已加入抗凝劑的血液請置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA，推薦使用EDTA作為抗凝劑)。
